检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质属于检验性实验。在实验过程中要注意以下问题:
1还原糖鉴定要注意的问题
1.1 做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。因为组织的颜色较浅,易于观察。而如果选择西瓜等带颜色的水果则其颜色会干扰实验结果。
1.2苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
1.3 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂,因为 斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70~90摄氏度下分解成黑色CuO和水。
2脂肪鉴定注意问题
2.1 干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。
2.2染色时间不宜过长,装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。
3蛋白质鉴定注意问题
3.1 A液和B液也要分开配制,储存。鉴定时先加A液后加B液。先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。
3.2CuSO4溶液不能多加。否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
3.3本实验材料可以用牛奶或豆浆代替蛋清,但如果用蛋清,要注意稀释,如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
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